Janusz Kłosiński od 1947 roku występował w łódzkich teatrach. W latach 1964 -1970 był dyrektorem Teatru Nowego. W 1970 roku przeniósł się do Warszawy, gdzie był członkiem zespołu Teatru Narodowego.

Aktor znany z roli Czernousowa w serialu „Czterej pancerni i pies”, zbójnika Kuśmidera w „Janosiku”, i dyrektora Wardowskiego w „Czterdziestolatku”. Grał też w filmach „Niespotykanie spokojny człowiek” czy „O dwóch takich co ukradli księżyc”.